產(chǎn)品概述：
本試劑盒采用改進(jìn)的SDS堿裂解法，吸附柱選擇性地吸附DNA的方法達(dá)到快速純化質(zhì)粒DNA的目的。適合于從4ml（OD600=3.0）或者8ml（OD600=1.5）以內(nèi)細(xì)菌培養(yǎng)物中提取多至40 μg高純的質(zhì)粒DNA，用于測(cè)序、體外轉(zhuǎn)錄與翻譯、限制性內(nèi)切酶消化、細(xì)菌轉(zhuǎn)化等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
一 、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性
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Cat.No. |
UE-MN-FP-10 |
UE-MN-FP-50 |
UE-MN-FP-250 |
UE-MN-FP-500 |
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Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
500 preps |
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Miniprep column A3 |
10 |
50 |
250 |
500 |
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2 ml Collection tube |
10 |
50 |
250 |
500 |
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RNase A |
6 μl |
30 μl |
150 μl |
300 μl |
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Buffer S1A |
3 ml |
15 ml |
75 ml |
150 ml |
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Buffer S2A |
3 ml |
15 ml |
75 ml |
150 ml |
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Buffer S3K |
5 ml |
21 ml |
105 ml |
210 ml |
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Buffer W2B concentrate |
4 ml |
16 ml |
2×48 ml |
2×80 ml |
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Eluent |
1 ml |
5 ml |
25 ml |
50 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
1 |
RNase A：50 mg/ml，室溫可貯存6個(gè)月，長(zhǎng)期貯存于-20℃。
Buffer S1A：細(xì)菌懸浮液，加入RNase A后，混合均勻，4℃貯存。
Buffer S2A：細(xì)菌裂解液（含 SDS/NaOH），室溫密閉貯存。
Buffer S3K：中和液，室溫密閉貯存。
Buffer W2B concentrate：去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）?；旌暇鶆?，室溫密閉貯存。
Eluent：洗脫液，室溫密閉貯存。
二 、注意事項(xiàng)
1. 加入Buffer S2A和Buffer S3K的兩個(gè)步驟操作必須溫和。劇烈搖晃將導(dǎo)致基因組DNA的污染。但混合必須充分，否則影響得率。
2. Buffer S2A使用后立即蓋緊瓶蓋，以免空氣中的CO?中和 Buffer S2A中的NaOH，降低裂解效率；裂解時(shí)間不宜超過5 min。
3. Buffer S2A、Buffer S3K含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣服，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚或眼睛時(shí)，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。
三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1. 第一次使用前，RNase A全部加入Buffer S1A 中，4℃貯存。
*對(duì)于小體積的RNase A，瞬時(shí)離心至管底，吸取一定體積Buffer S1A至RNase A管中混勻再加入Buffer S1A中。
2. Buffer S2A中含有SDS，低溫容易析出，使用前若有沉淀，請(qǐng)置于37℃水浴中加熱溶解至溶液變澄清方可使用。
3. 準(zhǔn)備無核酸和核酸酶污染的Tip頭、離心管。
4. 第一次使用前，Buffer W2B concentrate中加入指定體積的無水乙醇混勻備用，做好標(biāo)記。
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