產(chǎn)品概述:
本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中回收多至20 μg DNA(100 bp-15 kb),回收率為60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A溶液)中熔化,其中的保護劑能防止線狀DNA在高溫下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA選擇性結合到膜上。純化的DNA純度高,并保持片斷完整性和高生物活性,可直接用于連接、體外轉(zhuǎn)錄、PCR擴增、測序、微注射等分子生物學實驗。
一 、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性
Cat.No.
UE-MX-GX-10
UE-MX-GX-50
UE-MX-GX-250
UE-MX-GX-500
Kit size
10 preps
50 preps
250 preps
500 preps
Miniprep column B10 B10
10
50
250
500
2 ml Collection tube
10
50
250
500
Buffer DE-A
14 ml
2×33 ml
2×165 ml
2×330 ml
Buffer DE-B
7 ml
33 ml
165 ml
330 ml
Buffer W1
6 ml
28 ml
145 ml
280 ml
Buffer W2 concentrate
5 ml
24 ml
2×72 ml
2×120 ml
Eluent
1 ml
5 ml
25 ml
50 ml
Protocol manual
1
1
1
1
Buffer DE-A:凝膠熔化劑,含DNA保護劑,防止DNA在高溫下降解。室溫密閉貯存。
Buffer DE-B:結合液(促使大于70 bp的DNA片段選擇性結合到DNA吸附柱膜上)。室溫密閉貯存。
Buffer W1:洗滌液,室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate:去鹽液,使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均勻,室溫密閉貯存。
Eluent:洗脫液,室溫密閉貯存。
二、注意事項
1. Buffer DE-A(含有β-巰基乙醇)、Buffer DE-B 含刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套和眼鏡,避免沾染皮膚、眼睛和衣服,謹防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時,要立即用大量清水或生理鹽水沖洗,必要時尋求醫(yī)療咨詢。
2. 在凝膠回收步驟1中,將凝膠切成細小的碎塊可大大縮短凝膠熔化時間(線型 DNA長時間暴露在高溫條件下易于水解),從而提高回收率。勿將含 DNA 的凝膠時間地暴露在紫外燈下,減少紫外線對 DNA造成的損傷。
3. 在凝膠回收步驟2中,凝膠必須完全熔化,否則將嚴重影響 DNA 回收率。
4. 如果回收率較低,可在膠充分溶解后檢測pH值,如果pH大于7.5,可向含有DNA的膠溶液中加3M 醋酸鈉調(diào)節(jié)pH至4-6之間。
5. 將 Eluent 或去離子水加熱至 65°C,有利于提高洗脫效率。
6. DNA分子呈酸性,建議在 2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脫液中保存。
7. 回收率低建議:
1)步驟3之后混合液轉(zhuǎn)移至吸附柱可以放置2-5 min;
2)步驟3之后混合液過柱離心之后將濾液再次重復離心;
3)加熱洗脫液溫度;
4)洗脫液體積二次重復洗脫。







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