本試劑盒采用SDS堿裂解法，結(jié)合DNA制備膜選擇性吸附DNA。同時(shí)采用內(nèi)毒素去除柱有效去除內(nèi)毒素，可從80-200 ml （OD600 為1-1.5）細(xì)菌培養(yǎng)物中提取出多至600 μg 高純度質(zhì)粒 DNA，其內(nèi)毒素水平控制在0.1 EU/μg 以下。

一、 試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性

RNase A: 50 mg/ml,室溫可貯存6個(gè)月，長(zhǎng)期貯存于-20°C。

Buffer S1：細(xì)菌懸浮液。加入RNaseA后，混合均勻，4°C貯存。

Buffer S2：細(xì)菌裂解液（含SDS/NaOH),室溫密閉貯存。

Buffer S3K：中和液，室溫密閉貯存。

Buffer B: DNA結(jié)合溶液，室溫密閉貯存。

Buffer W1：洗滌液，室溫密閉貯存。

Buffer W2 concentrate：去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無(wú)水乙醇（可用無(wú)水乙醇或95%乙醇）。混合均勻，室溫密閉貯存。

Eluent A：洗脫液。室溫密閉貯存。

二、注意事項(xiàng)

1. 細(xì)菌過(guò)量將影響細(xì)菌裂解和質(zhì)粒DNA釋放，導(dǎo)致內(nèi)毒素含量過(guò)高。

2. 步驟3和步驟4的操作必須溫和。劇烈搖晃將導(dǎo)致基因組DNA的污染。但混合必須充分，否則影響得率。

3. 在加入Buffer S3K時(shí)，蛋白質(zhì)和基因組DNA形成粘稠的白色絮狀沉淀，必須充分混合均勻，使凝集塊中間也得到充分中和凝結(jié)。

4. Buffer S2、Buffer S3K、Buffer B和Buffer W1含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和防護(hù)眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣物，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染到皮膚或眼睛，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。