本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中回收多至8 μg DNA（70 bp-10 kb），回收率為60-85%。通過對(duì) BufferDE-A 進(jìn)行配方改良，消除了原本刺激性難聞的臭味，便于實(shí)驗(yàn)者安全地進(jìn)行操作使用。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液（DE-A溶液）中熔化，其中的保護(hù)劑能防止線狀DNA在高溫下降解，然后在DE-B溶液的作用下使DNA選擇性結(jié)合到膜上。純化的DNA純度高，并保持片斷完整性和高生物活性，可直接用于連接、體外轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增、測(cè)序、微注射等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

一、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性

Buffer A：制備管活化處理液，室溫密閉貯存。

Buffer DE-A：凝膠熔化劑，含DNA保護(hù)劑，防止DNA在高溫下降解。室溫密閉貯存。

Buffer DE-B：結(jié)合液（促使大于70 bp的DNA片段選擇性結(jié)合到DNA制備膜上）。室溫密閉貯存。

Buffer W2 concentrate: 去鹽液，使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無(wú)水乙醇（用100%乙醇或95%乙醇），混合均勻，室溫密閉貯存。

Eluent：洗脫液，室溫密閉貯存。

二 、注意事項(xiàng)

1. Buffer DE-A、Buffer DE-B 含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣服，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。

2. 在凝膠回收步驟1中，將凝膠切成細(xì)小的碎塊可大大縮短凝膠熔化時(shí)間(線型 DNA長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下易于水解)，從而提高回收率。勿將含 DNA 的凝膠時(shí)間地暴露在紫外燈下，減少紫外線對(duì) DNA造成的損傷。

3. 在凝膠回收步驟2中，凝膠必須完全熔化，否則將嚴(yán)重影響 DNA 回收率。

4. 如果回收率較低，可在膠充分溶解后檢測(cè)pH值，如果pH大于7.5，可向含有DNA的膠溶液中加3M 醋酸鈉調(diào)節(jié)pH至4-6之間。

5. 將 Eluent 或去離子水加熱至 65°C，有利于提高洗脫效率。

6. DNA分子呈酸性，建議在 2.5 mM Tris-HCl，pH 7.0-8.5 洗脫液中保存。

7. 回收率低建議：

1）步驟3之后混合液轉(zhuǎn)移至制備管可以放置2-5 min；

2）步驟3之后混合液過柱離心之后將濾液再次重復(fù)離心；

3）加熱洗脫液溫度；

4）洗脫液體積二次重復(fù)洗脫。