產(chǎn)品概述：
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貨號(hào) |
名稱(chēng) |
Abs/Em (nm) |
規(guī)格 |
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YP0059S |
YF®488-Phalloidin YF®488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（綠色） |
490/515 |
50 T |
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YP0059L |
300 T |
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YP0060S |
YF®555-Phalloidin YF®555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（橙紅） |
555/565 |
50 T |
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YP0060L |
300 T |
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YP0052S |
YF®594-Phalloidin YF®594標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（紅色） |
590/617 |
50 T |
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YP0052L |
300 T |
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YP0053S |
YF®633-Phalloidin YF®633標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（遠(yuǎn)紅） |
630/650 |
50 T |
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YP0053L |
300 T |
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YP0123S |
YF®640-Phalloidin YF®640標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（遠(yuǎn)紅） |
642/662 |
50 T |
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YP0123L |
642/662 |
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YP0055S |
YF®680-Phalloidin YF®680標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（近紅） |
681/698 |
50 T |
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YP0055L |
300 T |
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YP0063S |
Rhodamine-Phalloidin 羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（橙紅） |
546/575 |
50 T |
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YP0063L |
300 T |
儲(chǔ)存條件：-20℃干燥、避光保存，有效期見(jiàn)外包裝。若配制成水溶液，應(yīng)小量分裝保存。
應(yīng)用范圍：細(xì)胞骨架染色
產(chǎn)品介紹
鬼筆環(huán)肽是從致命的傘形毒蕈蘑菇中分離出來(lái)的一種毒素，可特異性結(jié)合于F-肌動(dòng)蛋白的雙環(huán)肽。因此用熒光染料標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可以非常方便地研究F-肌動(dòng)蛋白的分布。鬼筆環(huán)肽內(nèi)部，在半胱氨酸和色氨酸之間含有不常見(jiàn)的硫醚橋形成內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu)。在pH升高時(shí)，該硫醚被裂解，鬼筆環(huán)肽失去對(duì)肌動(dòng)蛋白的親和力。
YF®染料是我司開(kāi)發(fā)的一系列新一代熒光染料，與其他熒光染料相比，在亮度，光穩(wěn)定性和水溶性方面具有綜合優(yōu)勢(shì)。YF®熒光染料標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可在納摩爾水平染色F-肌動(dòng)蛋白。在各種植物細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞中，標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽對(duì)大、小細(xì)絲具有相似的親和力，平均每個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基結(jié)合一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子。不同于抗體，鬼筆環(huán)肽與肌動(dòng)蛋白的結(jié)合親和力在不同物種間沒(méi)有顯著變化。非特異性染色可以忽略不計(jì)，染色和未染色區(qū)域之間的對(duì)比度非常大。鬼筆環(huán)肽將單體/聚合物的平衡轉(zhuǎn)向聚合狀態(tài)，將聚合臨界濃度降低至30倍。鬼筆毒肽類(lèi) (Phallotoxins) 可通過(guò)抑制細(xì)胞松弛素的解聚，碘化鉀和升高的溫度，穩(wěn)定F-肌動(dòng)蛋白。因?yàn)楣砉P環(huán)肽綴合物很小，大約直徑12-15 ?，分子量< 2000 Daltons，多種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌鈣蛋白依然可以和鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白結(jié)合。更重要的是，鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲保持功能，標(biāo)記甘油肌纖維仍然收縮，標(biāo)記的肌動(dòng)蛋白絲仍然可以繼續(xù)移動(dòng)。而且熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽也可用于對(duì)細(xì)胞中F-肌動(dòng)蛋白進(jìn)行定量研究。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 本產(chǎn)品為凍干粉形式，微量不易觀(guān)察，使用前請(qǐng)瞬時(shí)離心，加適當(dāng)溶劑溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。
3. 若出現(xiàn)染色效果不佳時(shí)，可以采用含1%BSA的PBS預(yù)孵育20-30min，可改善染色效果。
常見(jiàn)問(wèn)題解答：
◆為什么我拿到的是空管？
本產(chǎn)品為凍干粉形式，微量不易觀(guān)察，使用前請(qǐng)瞬時(shí)離心，加適當(dāng)溶劑溶解后使用。
◆鬼筆環(huán)肽染色細(xì)胞骨架過(guò)程中，能使用甲醇固定細(xì)胞嗎？
甲醇會(huì)破壞Actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液，并且使用不含甲醇的甲醛。
◆為什么用鬼筆環(huán)肽結(jié)合F-actin標(biāo)記石蠟切片，沒(méi)有看到信號(hào)？
當(dāng)細(xì)胞和組織經(jīng)由二甲苯或丙酮之類(lèi)的溶劑處理時(shí)（例如組織切片脫石蠟期間），它通過(guò)阻止鬼筆環(huán)肽結(jié)合的方式來(lái)影響F-actin?？梢允褂猛ǔ２挥糜袡C(jī)溶劑洗滌的冷凍切片代替石蠟切片，或者可以使用抗肌動(dòng)蛋白抗體。
◆鬼筆環(huán)肽染料能重復(fù)利用嗎？
正常情況下染色液在使用后，可能會(huì)影響染色效果，最好不要重復(fù)使用；我們的鬼筆環(huán)肽按說(shuō)明書(shū)添加，濃度較低，這是染料不能重復(fù)利用的原因。
◆鬼筆環(huán)肽染色F-Actin, 有的染上，有的沒(méi)染上，并且染色信號(hào)較弱怎么辦？
（1）可能是染料濃度低或孵育時(shí)間不足，建議增加染料濃度或培養(yǎng)時(shí)間。
（2）可能是在錯(cuò)誤的波長(zhǎng)下分析細(xì)胞，建議重新檢查過(guò)濾器設(shè)置是否正確。
◆不進(jìn)行透化步驟，鬼筆環(huán)肽直接染色固定后的細(xì)胞可以嗎？
熒光標(biāo)記的phalloidins，只能用于在固定透化后的組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)和無(wú)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中染色F-actin。
◆染色后，沒(méi)有熒光信號(hào)怎么辦？
（1）檢查儲(chǔ)液、工作液配制是否有誤。
（2）固定及透化步驟尤為重要，使用新鮮配置的4%多聚甲醛進(jìn)行固定，使用新鮮配置的0.5% Triton X-100 進(jìn)行透化。摸索最佳的固定及透化時(shí)間。
（3）摸索最佳染色工作液濃度及染色時(shí)間。
◆可以用于做流式細(xì)胞嗎？
該產(chǎn)品主要是用于微絲的染色，一般用熒光顯微鏡觀(guān)察結(jié)果，不推薦用流式檢測(cè)。
◆可以用普通熒光顯微鏡觀(guān)察嗎？
普通的熒光顯微鏡也是可以檢測(cè)的，激光共聚焦拍照效果會(huì)更好一些。
◆探針的濃度是多少？
請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)的稀釋比例進(jìn)行使用，具體濃度信息未知。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn)：
Nature Communications volume 11
Yuetian Liu, Lijuan Du, Hua Zhang, Guanrong Li, Yang Luo, Zeming Hu, Rong Xu, Jie Yao, Zheyuan Shi, Yige Chen, Chi Zhang, Zhanping Jin, Caihua Zhang, Chanchan Xie, Jun Fu, Yabin Zhu and Yingchun Zhu
Renshuai Hua, Chenxi Zhao, Zhengyu Xu, Derong Liu, Wenyuan Shen, Wenlu Yuan, Yan Li, Jun Ma, Zhishuo Wang, Shiqing Feng
Ruixin Zhang, Shunshun Yan, Shichun Li, Yu Shi, Yueyue Yang, Junwu Liu, Zixuan Dong,Ting Wang, Jingxin Yue, Quhan Cheng, Ye Wan, Su Zhang, Shanshan Kang, Deling Kong, Kai Wang, Xiaoling Fu
參考文獻(xiàn)：
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
應(yīng)用方向：人體組織切片，心臟大鼠心肌細(xì)胞和密集生長(zhǎng)的神經(jīng)元培養(yǎng)物
2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應(yīng)用方向：組織切片、動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞
3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
應(yīng)用方向：哺乳動(dòng)物細(xì)胞：小鼠脾B細(xì)胞
4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應(yīng)用方向：組織切片
5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
應(yīng)用方向：組織切片
6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
應(yīng)用方向：植物細(xì)胞
7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
應(yīng)用方向：哺乳動(dòng)物細(xì)胞： 原代人類(lèi)成纖維細(xì)胞
8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
應(yīng)用方向：釀酒酵母菌細(xì)胞
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