產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品內(nèi)容
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規(guī)格 組分 |
C6034S (20T) |
C6034L (500T) |
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A. CFDA SE |
1管 |
1管× 5 |
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B. CFDA SE溶劑 |
20 μL |
500 μL |
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C. 10× CFDA SE Buffer |
1 mL ×2 |
50 mL |
儲(chǔ)存條件
-20℃避光保存，有效期見(jiàn)外包裝。
產(chǎn)品介紹
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒是基于CFDA SE對(duì)細(xì)胞進(jìn)行增殖及示蹤檢測(cè)的試劑盒，本試劑盒由CFDA SE粉末、溶劑及染色緩沖液組成。
CFDA SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具有細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)CFDA SE穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基共價(jià)結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上。同時(shí)，過(guò)量且未被偶聯(lián)的CFDA SE通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也很均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中，CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過(guò)流式細(xì)胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞，分裂一次（1/2的熒光強(qiáng)度），二次（1/4的熒光強(qiáng)度），三次（1/8的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFDA SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA SE最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)，也可用于成纖維細(xì)胞，NK細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外，還可用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3. CFDA SE溶劑在4oC、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25oC水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
4. 本試劑盒對(duì)CFDA SE染色體系做了優(yōu)化處理，但建議使用者根據(jù)自身的細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)條件以及應(yīng)用方向來(lái)梯度摸索最佳的工作濃度及染色時(shí)間。不同的細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)酯酶活性不同，因此染色效果具有差異性。
5. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，操作過(guò)程中請(qǐng)注意避光，以減緩熒光淬滅。
6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見(jiàn)問(wèn)題解答：
◆CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液的配制是必須用純水，還是用PBS就可以？
必須用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)純水
◆能否用于干細(xì)胞的增殖檢測(cè)？
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒可以用于各種常見(jiàn)細(xì)胞的增殖和示蹤檢測(cè)，包括干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等
◆您好，我用肝素全血做淋轉(zhuǎn)，可以用這個(gè)標(biāo)記嗎？具體步驟跟這個(gè)一樣嗎？
肝素全血做淋轉(zhuǎn)相關(guān)實(shí)驗(yàn)建議老師參考文獻(xiàn)資料確定，這邊暫時(shí)沒(méi)有相關(guān)步驟提供給您的，目前該探針主要用于細(xì)胞增殖的標(biāo)記
◆嘗試在懸浮狀態(tài)下標(biāo)記細(xì)胞，并通過(guò)CFDA SE標(biāo)記來(lái)追蹤它們，但標(biāo)記后它們將不再粘附在表面上（而未標(biāo)記的細(xì)胞粘附良好），試過(guò)在10和20μM處標(biāo)記，這是什么原因造成的？
這種染料將通過(guò)伯胺與蛋白質(zhì)結(jié)合，濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞毒性或細(xì)胞功能的意外改變。解決方案是減少濃度或染色時(shí)間，或使用非蛋白結(jié)合追蹤試劑
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